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2. MEDIOS DE CULTIVOS
BACTERIANOS
LINDA LUCIA
JURIS OYOLA

3. CONCEPTO
Un medio de cultivo bacteriano es una solución o gel que contiene
los nutrientes necesarios para el crecimiento y la diferenciación de
bacterias, hongos y virus en el laboratorio. Estos medios contienen
nutrientes, fuentes de energía, factores de crecimiento, sales
minerales, metales, agentes amortiguadores y agentes gelificantes
(para medios sólidos). Los medios de cultivo pueden ser líquidos,
sólidos o semisólidos.

4. COMPOSICION
Los medios de cultivo bacterianos son formulados con una serie de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que proporcionan las condiciones
necesarias para el desarrollo de bacterias en el laboratorio. Algunos de los elementos comunes en los medios de cultivo incluyen:
• AGUA: Es un componente básico para la vida.
• PEPTONAS: se obtiene por hidrolisis acida o enzimática de proteína
• HIDRATOS DE CARBONO: Su utilizado universalmente es la glucosa pero en algunos medios se agregan también polisacáridos
• EXTRACTO DE CARNES: Es un concentrado de productos hidrosolubles de la carne de composición indefinida.
• EXTRACTO DE LEVADURA: Es un producto de la hidrolisis acida o enzimática de la levadura previamente lisada por calor.
• SUERO O SANGRE DE CABALLO O DE CARNERO: Son elementos muy útiles para microorganismos exigentes.
• CLORURO DE SODIO:. Equilibra la presión osmótica del medio a fin de evitar la lisis celular por choque osmótico.
• MINERALES Y OTRAS SUSTANCIAS QUE LOS MICROORGANISMOS NO SINTETIZAN: . Este es el caso de la hemina, ácido glutámico, fósforo,calcio, hierro,
manganeso, magnesio, etc.
• AGENTES SOLIDIFICANTES: Agentes solidificantes se utilizan en los medios de cultivo bacterianos para convertirlos en medios sólidos o semi-sólidos. El agar es
el más común y eficaz, siendo extraído de algas rojas como Gelidiaceae. Otras opciones menos comunes incluyen el gel de sílice (silicato sódico o potásico) y la
gelesilicona (gelatina). El agar es el preferido debido a su facilidad de disolución y a que no impide el crecimiento de bacterias a pH ácido, aunque el gel de sílice se
utiliza para medios de cultivo definidos y para bacterias autótrofas estrictas. Además, el agar es menos caro y más fácil de incorporar en comparación con otros
agentes solidificantes

5. PREPARACION
Para preparar un medio de cultivo bacteriano, se disuelven las sustancias necesarias en
agua, luego se calientan para facilitar la disolución de la mezcla hasta lograr una solución
homogénea. Posteriormente, se ajusta el pH al valor óptimo para el crecimiento deseado.
Luego, la solución se distribuye en tubos para su esterilización mediante calentamiento
húmedo en autoclaves.
Sin embargo, en algunos casos, los medios contienen sustancias termolábiles y requieren
métodos alternativos de esterilización, como la filtración por membranas o la tindalización.
Tras la esterilización, se conservan los medios en un frigorífico, aunque también pueden
verseterse en placas de Petri en el caso de medios sólidos destinados a su uso inmediato.

6. CONDICIONES DE CULTIVOS
Para conseguir el cultivo microbiano adecuado, se deben considerar determinadas condiciones
ambientales durante la incubación:
Temperatura: Generalmente, la óptima para el crecimiento bacteriano es de 36 ± 1 °C, aunque hay
excepciones para bacterias especiales.
Atmosfera: Las bacterias aeróbicas o anaeróbicas facultativas se incuban en presencia de oxígeno,
mientras que las anaeróbicas estrictas requieren atmósferas reductoras, como 85-90% de N2, 5-10%
de H2 y 5% de CO2. Las microaerofílicas necesitan 5% de CO2 y 85% de N2
Presión osmótica: Los medios de cultivo normalmente contienen una concentración de NaCl del 1%,
suficiente para lograr la osmolaridad requerida para la mayoría de las bacterias. En el caso de
bacterias halófilas, debe añadirse NaCl hasta su nivel requerido.
Humedad: Todos los microorganismos benefician de una buena humedad.
pH: La mayoría de las bacterias crecen mejor a pH cercanos a la neutralidad. El ajuste de pH se logra
con NaOH o KOH y ClH. Puede asegurarse su estabilidad en el medio mediante la adición de
tampones como, por ejemplo, el sistema KH2PO4 / K2HPO4.

7. CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS
Según su contenido:
Definidos o sintéticos: con composición quimica conocida.No sintéticos o empíricos: con
composición desconocida, elaborados con extractos naturales.
- Según su estado:
Líquidos: sin sustancias solidificantes, utilizados para inocular muestras o para observar
características de crecimiento.
Semisólidos: con agar en baja proporción, utilizados para analizar caracteristicas especiales
de las bacterias.
Sólidos: con agar en cantidad suficiente para soliditicar, utilizados para obtenercolonias
bacterianas
.• Según su utilización en el laboratorio:
Básicos o comunes: para bacterias no exigentes con nutrientes minimos.
Enriquecidos: básicos suplementados con sustancias nutritivas para bacterias
exigentes.Selectivos: permiten el crecimiento de algunas bacterias e inhiben el de otras.
Diferenciales: revelan visualmente características bioquímicas de las bacterias

8. CONTROL DE MEDIOS DE CULTIVOS
Para garantizar la idoneidad de los medios de cultivo, se deben realizar tres tipos de
controles:
• Control de esterilidad: Se lleva a cabo incubando una muestra aleatoria del lote (5%) en
placas o tubos con caldo durante dos días a 35 °C y cinco días a temperatura ambiente
para verificar la ausencia de contaminación.
• Control de calidad: Se emplean al menos dos microorganismos diferentes, uno que debe
crecer o dar resultados positivos en pruebas específicas, y otro que no debe crecer o dar
resultados negativos. Se utilizan cepas de referencia internacional, como las de ATCC,
para este propósito.
• Control de caducidad: Es esencial etiquetar las placas con la fecha de preparación. En
promedio, los medios pueden conservarse en nevera (4 °C) entre 6 y 21 días sin bolsa de
plástico, y entre 10 y 90 días si se almacenan en bolsas selladas antes de su
vencimiento.

9. LOS MEDIOS DE CULTIVO EN EL DIAGNÓSTICO DIRECTO DE LAS ENFERMEDADES
INFECCIOSAS
El diagnóstico directo en microbiología busca identificar los agentes patógenos responsables de
una enfermedad infecciosa en una muestra clínica mediante métodos como observación
microscópica, detección de antígenos y ácidos nucleicos. En el laboratorio, se emplean medios
de cultivo líquidos y sólidos para aislar y estudiar bacterias presentes en la muestra. El proceso
implica sembrar la muestra en medios líquidos para luego pasar a medios sólidos, donde se
forman colonias bacterianas a partir de una sola célula madre. Para obtener cultivos puros, se
realizan siembras por agotamiento y se procede a identificar las cepas mediante pruebas
bioquímicas, morfológicas y moleculares.
La identificación de microorganismos se realiza mediante pruebas bioquímicas convencionales o
paneles miniaturizados que detectan cambios enzimáticos, de pH, entre otros. La observación de
las colonias proporciona información valiosa sobre el microorganismo, como tamaño, color,
bordes, superficie, consistencia y hemólisis. Estos datos son clave para la identificación precisa
de las bacterias presentes en la muestra clínica.

10. IMPORTACIA Y UTILIDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS
Los medios de cultivo son esenciales en microbiología al proporcionar un entorno propicio
para el crecimiento y multiplicación de microorganismos, facilitando su aislamiento e
identificación. Estos medios contienen los nutrientes necesarios para el crecimiento
microbiano y pueden ser sólidos o líquidos, selectivos o diferenciales. Son cruciales en la
detección de microorganismos patógenos, en la investigación clínica e industrial, así como
en la producción de alimentos y otros sectores. La selección y concentración adecuada de
nutrientes son clave en el diseño de medios óptimos para el crecimiento y producción de
metabolitos microbianos.