A apresentação foi cuidadosamente elaborada para fornecer uma visão abrangente e detalhada dos conceitos fundamentais da sorologia, essenciais para o trabalho diário dos técnicos de laboratórios especializados nessa área. Ao abordar temas relevantes e atualizados da sorologia de bancos de sangue, a apresentação visa não apenas informar, mas também capacitar os profissionais para lidar com as demandas complexas e desafiadoras do ambiente laboratorial. Durante a elaboração, foram consideradas referências de grande importância e credibilidade na área, garantindo a precisão e relevância das informações apresentadas. Além disso, a apresentação foi estruturada de forma a facilitar a compreensão e a assimilação dos conceitos, com exemplos práticos e casos clínicos que ilustram a aplicação dos conhecimentos no dia a dia do técnico de laboratório. Ao final da apresentação, espera-se que os técnicos tenham adquirido uma compreensão mais profunda e abrangente dos princípios da sorologia de bancos de sangue, estando mais preparados para enfrentar os desafios e as exigências do seu trabalho. Acredita-se que essa abordagem detalhada e cuidadosamente planejada contribuirá significativamente para a formação e o desenvolvimento profissional desses técnicos, impactando positivamente a qualidade dos serviços prestados nos laboratórios de sorologia.

1. CURSO MULTIDISCIPLINAR DE ESPECIALIZAÇÃO EM HEMOTERAPIA
Técnicas Sorológicas para o diagnóstico
das
Doenças Transmissíveis pelo Sangue
(DTS)

2. A triagem sorológica
em doadores de
sangue é uma
atividade de alta
complexidade e uma
das etapas cruciais
para a diminuição

3. CMV e MALÁRIA

4. HIV
HCV
HBV
HTLV
Bactérias
CMV
Plasmodium
Tripanossoma

5. Anticorpos e Antígenos
Moléculas
capazes de
reagir com
um anticorpo.
Essa reação
pode provocar
ou não uma
resposta do
nosso sistema
imune
Glicoproteínas
conhecidas como
imunoglobulinas
(Ig). Essas
proteínas, bastante
específicas,
apresentam a
capacidade de
interagir com o
antígeno que
desencadeou sua
formação.

6. Provoca Síndrome da
Imunodeficiência Adquirida (AIDS)
http://unaids.org.br/estatisticas/2017
HIV

7. HIV

8. Boletim Epidemiológico Hepatites virais, 2016
Provoca hepatites
HBV e HCV

9. HBV

10. HCV

11. “A doença, mesmo sem sintomas, é perigosa. O estudo analisou doadores de sangue
entre 1996 e 2000 e foi relatado que as pessoas com a doença de Chagas, sem nenhum
sintoma, têm duas vezes mais chances de morrer do que as saudáveis. O principal
objetivo desse estudo foi trazer dados que mostrem a importância da infecção e que
chamem a atenção para o problema”
Provoca Doença de Chagas
Trypanossoma cruzi
Capuani et. al., 2017

12. Trypanossoma cruzi

13. Provoca Sífilis
Treponema pallidum
Boletim Epidemiológico, Secretaria de Vigilância
em Saúde – Ministério da Saúde, 2016

14. Provoca graves doenças neurológicas e
hematológicas (leucemia ou linfoma de células T)
HTLV
Cidade %
São Paulo 0,15
Rio de Janeiro e Recife 0,43
Belem 1,00
Salvador 1,35
Porto Alegre 0,04
Belo Horizonte 0,32
Manaus e Florianópolis 0,08
Prevalência
Catalan-Soares et. al., 2005

15. TESTES OBRIGATÓRIOS PELA LEGISLAÇÃO
Portaria 158/2016
• HBsAg
• Anti-HBc
HBV
• Anti-HCV
• Ag/Ac C
HCV
• Anti-HIV 1 +2 + O
• Ac/Ag p24
HIV
• Anti – T. cruzi
CHAGAS
• Anti – T. pallidum
• VDRL/RPR
SÍFILIS
• Anti – HTLV 1 e 2
HTLV
NAT
NAT
NAT

16. TESTES DE TRIAGEM
Alta sensibilidade
• Imunoenzimático - Elisa
• Quimioluminescência
• Eletroquimioluminescência
• Floculação
TESTES CONFIRMATÓRIOS
Alta especificidade
• Imunofluorescência
• Neutralização para HBsAg
• W. Blot
• Imunoblot
• Biologia Molecular
METODOLOGIA DE TESTAGEM

19. Limite de reatividade – Cut off

20. Ensaio de Imunoabsorção enzimática - ELISA
Detecta
anticorpo
Detecta
antígeno
Detecta antígeno com
baixo peso molecular
Adaptado de Satija et al., 2016

21. ELISA Direto ou Sanduíche
Etapas dos Imunoensaios

22. anticorpo
adsorvido no
poço

23.  Aplicações do ELISA:
 Testes de rotina em Laboratórios Clínicos e de Pesquisa
 Vantagens:
 Teste de alta sensibilidade
 Permite quantificar Ag ou Ac das amostras
 Seguros e de baixo custo
Etapas dos Imunoensaios

24. Etapas dos Imunoensaios
Testes de 4ª Geração

25. Adaptado de Rebouças, 2010
Quimioluminescência

26. Floculação
VDRL - Venereal Disease Research Laboratory

27. • HBsAg
• Anti-HBc
HBV
• Anti-HCV
HCV
• Anti-HIV 1 e 2
HIV
• Anti – T. cruzy
CHAGAS
• Anti – T. pallidum
SÍFILIS
• Anti – HTLV 1 e 2
HTLV
TESTES UTILIZADOS NA TRIAGEM SOROLÓGICA DE DOADORES
HEMORIO

28. Testes Confirmatórios

29. Importância do monitoramento de todo o processo
Adaptado de Flebani e Carrarro, 2007
Desvios durante o processo analítico
Pré-Analítica
60%
Analítica
15%
Pós-Analítica
25%
Doador Resultado
Preparo do doador
Coleta
Transporte
Aliquotagem
Calibração dos equipamentos
Controle de Qualidade
Análise
Softwares
Emissão de resultados

30. Controle do processo de triagem sorológica
• Antes e após a aquisição
Validações de
Processos
• Lotes e remessas
Qualificação dos
kits
• Equipamentos e acessórios
Calibrações
periódicas
• Preventivas e Corretivas
Manutenções de
equipamentos
• Controles de Qualidade e
temperaturas da Cadeia do Frio
Monitoramento
diário

31. Erros nas
avaliações dos
kits e nas
realizações dos
ensaios
sorológicos
poderão trazer

32. JANELA IMUNOLÓGICA
Apesar dos métodos
de triagem
sorológica serem
muito sensíveis, a
ausência de
anticorpos contra
um determinado
agente não descarta
totalmente a
possibilidade de
Janela Imunológica

33. Inaptidão Sorológica

34. Dados interessantes

35. Dados importantes

36. Dados importantes

37. Dados importantes

38. Fonte: Adaptado de Levi, 2016
Um provável futuro na detecção de agentes transmissíveis pelo sangue

39. Microarranjo líquido
Fonte: Nature Biotechnology, 2001
Um provável futuro na detecção de agentes transmissíveis pelo sangue

40. Palacios et al., 2008
Um provável futuro na detecção de agentes transmissíveis pelo sangue
NGS – Next Generation Sequencing