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Suero Plasma
Cuando sacamos sangre y permitimos que la muestra coagule, se
desarrolla la cascada de coagulación y se forma un coagulo que tiene
atascado al paquete celular junto con la fibrina, la cual polimerizó y
formó este paquete, con centrifugación podemos separar este paquete
y la fibrina dejando la parte líquida con la parte soluble. Si colocamos
anticoagulante se captura el calcio y el coágulo no es desarrollado
Se obtiene cuando
centrifugamos sangre no
coagulada, es muy rico
en albúminas e
inmunoglobulinas
Nutrición proteica
Transporte de iones y aminoácidos que podrían ser usados en procesos
metabólicos.
Presión oncótica y
balance hídrico
La molécula que forma la mayor fracción de proteínas plasmáticas es la
albúmina, esta molécula retiene líquido, por lo tanto si se pierde
albúmina en el plasma habrá pérdida de líquido hacia el torrente
sanguíneo, por esto la albúmina contribuye al balance oncótico.
Taponamiento de H+ Balance de pH gracias a que los aminoácidos ceden o captan protones
Transporte
Lípidos, vitaminas liposolubles, hormonas, iones, etc. Los ácidos grasos
de cadena corta y media son transportados por la albúmina y los de
cadena larga con otro transportador
Función protectora
Inmunoglobulinas o anticuerpos, complemento, factores de
coagulación.
Inhibidor de proteasas
Las proteasas son enzimas que degradan proteínas. Por lo tanto las
proteínas plasmáticas son reguladoras de proteasas.
BIOQUÍMICA
PLASMÁTICAS
Proteínas
DIFERENCIAS ENTRE SUERO Y PLASMA
¿Qué son?
Las proteínas plasmáticas son proteínas globulares de
estructura terciaria que encontramos en el plasma
sanguíneo, el cual se obtiene cuando centrifugamos
sangre no coagulada, la mayor parte de las proteínas
plasmáticas se sintetizan en el hígado.
FUNCIONES DEL LAS PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
Electroforesis de las proteínas plasmáticas
La lámina de acetato de celulosa en la que se coloca la muestra de suero o sangre permite
que las proteínas se separen según su carga, tamaño y cantidad. Para poder visualizar las
fracciones en la lámina se tiñe la muestra con clorofenol o rojo ponzo por ejemplo. Luego la
lámina es llevada al densitómetro el cual permite ver las fracciones que componen proteínas.
Nos permite diferenciar
fracciones de proteínas
plasmáticas que se
encuentran en el plasma
o suero.
Esto se debe a que las
proteínas plasmáticas a
pH 7 tienen carga
negativa, haciendo que
en un campo eléctrico,
las proteínas que están
cargadas negativamente
migren al cátodo
separándose.
Lectura del densitograma electroforético
La altura del pico nos da una idea de la cantidad y el
ancho habla sobre la homogeneidad de la muestra,
en el caso de la albúmina por ejemplo el pico es alto
por la cantidad y estrecho porque encontramos una
sola proteína. En cambio el pico de las proteínas
gamma, prácticamente es una meseta, este ancho
es debido a la variedad de proteínas gama
existentes.
Proteínas plasmáticas
Proteínas
plasmáticas con
funciones
transportadoras
Antitripsina
Inhibidor de la proteasa tripsina. Cuando la tripsina se activa donde no
debe podría llegar a desarrollar enfermedades en el pulmón, hígado o
estómago, debido a que esta hidroliza proteínas y podría hidrolizar
proteínas que son principales. La tripsina se sintetiza como zimógeno
(precursor inactivo).
Haptoglobina
Se liga a la hemoglobina cuando hay hidrólisis de hematíes para que no
sea eliminada y la lleva a los depósitos para que pueda ser aprovechada
Alfa 2 microglobulina Cumple un rol muy importante en la cascada de coagulación
Transferrina
Transporta hierro y está involucrada en las cascadas inflamatorias,
cuando tenemos reacciones inflamatorias desmedidas la transferrina
aumenta en sangre
Fibrinógeno
Muy conocido por su actuación en la coagulación sanguínea, si
queremos encontrar fibrinógeno en el densitograma electroforético
tenemos que poner plasma como muestra ya que se consume en la
coagulación del suero.
Albúmina
En el caso de problemas hepáticos la albúmina puede no ser sintetizada en la cantidad
debida lo que ocasiona la fuga de líquido hacia el ambiente intersticial causando en el
paciente hinchazón en el miembro inferior y también edemas.
En algunas enfermedades renales no se retiene correctamente albúmina en el riñón lo que
causa la pérdida de la proteína y fuga en el espacio intersticial formando también glico
derivados.
En adultos la concentración normal de bilirrubina es 3,5 a 5,2 g/L
En caso de hipoalbuminemia el pico de la proteína en el densitograma podría verse más
apagado, estrecho y/o más bajo de lo normal
Forman el 55% a 60%
de las proteínas
plasmáticas, posee
carga negativa, se
sintetiza en el hígado y
es el componente que
en un 75% mantiene la
presión osmótica o sea
impide que el agua se
fugue.
Inmunoglobulina G
Considerando toda la fracción de inmunoglobulinas las inmunoglobulina G se encuentra en
mayor cantidad.
Dos cadenas pesadas o
Heavy (H)
Encontramos los dominios constantes C1, C2, C3 y un dominio VH que
tiene una estructura de aminoácidos que es variable en su extremo N
terminal
Dos cadenas livianas o
light (L)
Aquí también podemos encontrar un dominio variable en su extremo N
terminal
Dominio variable
Este dominio es el que interactúa con el antígeno y por lo tanto al
encajar como llave/cerradura con el agente externo debe variar la
secuencia de aminoácidos
Papaína Pepsina
La papaína corta la estructura antes de la
región de bisagra que está estabilizada
por puentes disulfuro obteniendo así dos
puentes FAB y una fracción llamada FC
(Fracción cristalizada)
La pepsina corta la estructura después de la región de
bisagra que está estabilizada por puentes disulfuro. Se
obtuvo una fracción con la cadena pesada y la cadena
ligera, el resto del tallo queda hidrolizado(degradado) por la
proteasa.
La fracción que se conserva es la de unión a antígeno (FAB).
Está involucrada en la
respuesta tardía y específica
de nuestra inmunidad
Son producidos por linfocitos
B
Es capaz de unirse a
linfocitos T o actuar en
cascadas de activación
Hidrólisis de inmunoglobulinas por pepsina o papaína
Clases de inmunoglobulinas
IgM: Se la llama IgM porque sus
cadenas pesadas están formadas
por miu. La respuesta aguda a una
infección estará mediada por la IgM
, pero esta luego desaparece. Por lo
tanto puede servir para saber en
qué fase (aguda o crónica) se
encuentra el paciente. Se
encuentra en forma multimérica
(pentámero).
IgG: Se llama IgG porque sus cadenas pesadas están formadas por gamma. Cuando ya no se
encuentra IgM se podría encontrar IgG. Se encuentra en forma de monómero
IgA: Se llama IgA porque su cadena pesada es alfa. Medida de respuesta inmune de la
mucosa tanto del epitelio respiratorio como del tracto intestinal. Se encuentra en forma
multimérica (dímero)
IgD: Se llama IgD porque su cadena pesada es delta. Se encuentra en forma de monómero
IgE: Se encuentra en forma de monómero. Media la mayoría de las reacciones alérgicas.
Proteínas de la fase agua (inflamación)
Ante daño tisular, estrés,
estrés por el calor,
hematomas, estrés
psicológico se
desencadenan respuestas
inflamatorias, se activan
monocitos y macrófagos
que desencadenan la
liberación de mediadores
de la inflamación como la
interleucina 1, la interleucina
6, el factor de crecimiento
tumoral, el interferón, etc.
Es importante recordar que los mencionados son mediadores de inflamación y esto hace que
el hígado segregue PCR, antiquimiotripsina, fibrinógeno, aumento de la proteína C reactiva y
disminuye la síntesis de albúmina y transferrina
En la fase aguda se ven muchos casos de
PCR elevada. Esta proteína le envía una
señal del patógeno al sistema
inmunológico para que pueda atacar el
complemento sérico, a activar el sistema
del complemento sérico aumenta la
inflamación y aumenta aún más en
infecciones baterianas
Proteínas de la fase agua (inflamación)
Cuando la fricción que tienen las
células entre ellas disminuye, la
velocidad de sedimentación
sanguínea va a acelerarse. En
embarazadas la velocidad de
sedimentación sanguínea es más
rápida porque retienen líquido.
Por lo tanto, las células no están
apretadas y pueden bajar más rápido
debido a la acción de la gravedad.
Entonces, en una hora cuando la esto tenga que bajar de 1 a 20, las mujeres embarazadas
tendrán 24,30.
En caso de no existir un embarazo esto no debería pasar, y si es así, es anormal. Cuando hay un
aumento de proteína en la base aguda del fibrinógeno, también se acelera, debido a la respuesta
agua a la inflamación.
Esta técnica es muy inespecífica pero puede usarse como complemento para confirmar
diagnóstico.
Mieloma múltiple
En una persona que tiene mieloma múltiple podemos ver dos cosas, primero, la albúmina es
normal, sin embargo en la fracción gamma observamos que el pico es largo y estrecho, esto
indica un aumento de fracción gamma. En el mieloma múltiple las células B, se transforman, se
vuelven malignas, y al responder algún antígeno empiezan a producir anticuerpos de forma
exagerada.
En un densitograma de orina podemos observar que una gran cantidad de proteínas en la
fracción gamma pero son de cadenas ligeras debido a que las cadenas constantes debido a su
tamaño no se pueden filtrar por el riñón, las cadenas ligeras son las llamadas proteínas de Benses
Jones

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  • 1. Suero Plasma Cuando sacamos sangre y permitimos que la muestra coagule, se desarrolla la cascada de coagulación y se forma un coagulo que tiene atascado al paquete celular junto con la fibrina, la cual polimerizó y formó este paquete, con centrifugación podemos separar este paquete y la fibrina dejando la parte líquida con la parte soluble. Si colocamos anticoagulante se captura el calcio y el coágulo no es desarrollado Se obtiene cuando centrifugamos sangre no coagulada, es muy rico en albúminas e inmunoglobulinas Nutrición proteica Transporte de iones y aminoácidos que podrían ser usados en procesos metabólicos. Presión oncótica y balance hídrico La molécula que forma la mayor fracción de proteínas plasmáticas es la albúmina, esta molécula retiene líquido, por lo tanto si se pierde albúmina en el plasma habrá pérdida de líquido hacia el torrente sanguíneo, por esto la albúmina contribuye al balance oncótico. Taponamiento de H+ Balance de pH gracias a que los aminoácidos ceden o captan protones Transporte Lípidos, vitaminas liposolubles, hormonas, iones, etc. Los ácidos grasos de cadena corta y media son transportados por la albúmina y los de cadena larga con otro transportador Función protectora Inmunoglobulinas o anticuerpos, complemento, factores de coagulación. Inhibidor de proteasas Las proteasas son enzimas que degradan proteínas. Por lo tanto las proteínas plasmáticas son reguladoras de proteasas. BIOQUÍMICA PLASMÁTICAS Proteínas DIFERENCIAS ENTRE SUERO Y PLASMA ¿Qué son? Las proteínas plasmáticas son proteínas globulares de estructura terciaria que encontramos en el plasma sanguíneo, el cual se obtiene cuando centrifugamos sangre no coagulada, la mayor parte de las proteínas plasmáticas se sintetizan en el hígado. FUNCIONES DEL LAS PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
  • 2. Electroforesis de las proteínas plasmáticas La lámina de acetato de celulosa en la que se coloca la muestra de suero o sangre permite que las proteínas se separen según su carga, tamaño y cantidad. Para poder visualizar las fracciones en la lámina se tiñe la muestra con clorofenol o rojo ponzo por ejemplo. Luego la lámina es llevada al densitómetro el cual permite ver las fracciones que componen proteínas. Nos permite diferenciar fracciones de proteínas plasmáticas que se encuentran en el plasma o suero. Esto se debe a que las proteínas plasmáticas a pH 7 tienen carga negativa, haciendo que en un campo eléctrico, las proteínas que están cargadas negativamente migren al cátodo separándose. Lectura del densitograma electroforético La altura del pico nos da una idea de la cantidad y el ancho habla sobre la homogeneidad de la muestra, en el caso de la albúmina por ejemplo el pico es alto por la cantidad y estrecho porque encontramos una sola proteína. En cambio el pico de las proteínas gamma, prácticamente es una meseta, este ancho es debido a la variedad de proteínas gama existentes. Proteínas plasmáticas Proteínas plasmáticas con funciones transportadoras
  • 3. Antitripsina Inhibidor de la proteasa tripsina. Cuando la tripsina se activa donde no debe podría llegar a desarrollar enfermedades en el pulmón, hígado o estómago, debido a que esta hidroliza proteínas y podría hidrolizar proteínas que son principales. La tripsina se sintetiza como zimógeno (precursor inactivo). Haptoglobina Se liga a la hemoglobina cuando hay hidrólisis de hematíes para que no sea eliminada y la lleva a los depósitos para que pueda ser aprovechada Alfa 2 microglobulina Cumple un rol muy importante en la cascada de coagulación Transferrina Transporta hierro y está involucrada en las cascadas inflamatorias, cuando tenemos reacciones inflamatorias desmedidas la transferrina aumenta en sangre Fibrinógeno Muy conocido por su actuación en la coagulación sanguínea, si queremos encontrar fibrinógeno en el densitograma electroforético tenemos que poner plasma como muestra ya que se consume en la coagulación del suero. Albúmina En el caso de problemas hepáticos la albúmina puede no ser sintetizada en la cantidad debida lo que ocasiona la fuga de líquido hacia el ambiente intersticial causando en el paciente hinchazón en el miembro inferior y también edemas. En algunas enfermedades renales no se retiene correctamente albúmina en el riñón lo que causa la pérdida de la proteína y fuga en el espacio intersticial formando también glico derivados. En adultos la concentración normal de bilirrubina es 3,5 a 5,2 g/L En caso de hipoalbuminemia el pico de la proteína en el densitograma podría verse más apagado, estrecho y/o más bajo de lo normal Forman el 55% a 60% de las proteínas plasmáticas, posee carga negativa, se sintetiza en el hígado y es el componente que en un 75% mantiene la presión osmótica o sea impide que el agua se fugue. Inmunoglobulina G Considerando toda la fracción de inmunoglobulinas las inmunoglobulina G se encuentra en mayor cantidad.
  • 4. Dos cadenas pesadas o Heavy (H) Encontramos los dominios constantes C1, C2, C3 y un dominio VH que tiene una estructura de aminoácidos que es variable en su extremo N terminal Dos cadenas livianas o light (L) Aquí también podemos encontrar un dominio variable en su extremo N terminal Dominio variable Este dominio es el que interactúa con el antígeno y por lo tanto al encajar como llave/cerradura con el agente externo debe variar la secuencia de aminoácidos Papaína Pepsina La papaína corta la estructura antes de la región de bisagra que está estabilizada por puentes disulfuro obteniendo así dos puentes FAB y una fracción llamada FC (Fracción cristalizada) La pepsina corta la estructura después de la región de bisagra que está estabilizada por puentes disulfuro. Se obtuvo una fracción con la cadena pesada y la cadena ligera, el resto del tallo queda hidrolizado(degradado) por la proteasa. La fracción que se conserva es la de unión a antígeno (FAB). Está involucrada en la respuesta tardía y específica de nuestra inmunidad Son producidos por linfocitos B Es capaz de unirse a linfocitos T o actuar en cascadas de activación Hidrólisis de inmunoglobulinas por pepsina o papaína
  • 5. Clases de inmunoglobulinas IgM: Se la llama IgM porque sus cadenas pesadas están formadas por miu. La respuesta aguda a una infección estará mediada por la IgM , pero esta luego desaparece. Por lo tanto puede servir para saber en qué fase (aguda o crónica) se encuentra el paciente. Se encuentra en forma multimérica (pentámero). IgG: Se llama IgG porque sus cadenas pesadas están formadas por gamma. Cuando ya no se encuentra IgM se podría encontrar IgG. Se encuentra en forma de monómero IgA: Se llama IgA porque su cadena pesada es alfa. Medida de respuesta inmune de la mucosa tanto del epitelio respiratorio como del tracto intestinal. Se encuentra en forma multimérica (dímero) IgD: Se llama IgD porque su cadena pesada es delta. Se encuentra en forma de monómero IgE: Se encuentra en forma de monómero. Media la mayoría de las reacciones alérgicas. Proteínas de la fase agua (inflamación) Ante daño tisular, estrés, estrés por el calor, hematomas, estrés psicológico se desencadenan respuestas inflamatorias, se activan monocitos y macrófagos que desencadenan la liberación de mediadores de la inflamación como la interleucina 1, la interleucina 6, el factor de crecimiento tumoral, el interferón, etc. Es importante recordar que los mencionados son mediadores de inflamación y esto hace que el hígado segregue PCR, antiquimiotripsina, fibrinógeno, aumento de la proteína C reactiva y disminuye la síntesis de albúmina y transferrina En la fase aguda se ven muchos casos de PCR elevada. Esta proteína le envía una señal del patógeno al sistema inmunológico para que pueda atacar el complemento sérico, a activar el sistema del complemento sérico aumenta la inflamación y aumenta aún más en infecciones baterianas
  • 6. Proteínas de la fase agua (inflamación) Cuando la fricción que tienen las células entre ellas disminuye, la velocidad de sedimentación sanguínea va a acelerarse. En embarazadas la velocidad de sedimentación sanguínea es más rápida porque retienen líquido. Por lo tanto, las células no están apretadas y pueden bajar más rápido debido a la acción de la gravedad. Entonces, en una hora cuando la esto tenga que bajar de 1 a 20, las mujeres embarazadas tendrán 24,30. En caso de no existir un embarazo esto no debería pasar, y si es así, es anormal. Cuando hay un aumento de proteína en la base aguda del fibrinógeno, también se acelera, debido a la respuesta agua a la inflamación. Esta técnica es muy inespecífica pero puede usarse como complemento para confirmar diagnóstico. Mieloma múltiple En una persona que tiene mieloma múltiple podemos ver dos cosas, primero, la albúmina es normal, sin embargo en la fracción gamma observamos que el pico es largo y estrecho, esto indica un aumento de fracción gamma. En el mieloma múltiple las células B, se transforman, se vuelven malignas, y al responder algún antígeno empiezan a producir anticuerpos de forma exagerada. En un densitograma de orina podemos observar que una gran cantidad de proteínas en la fracción gamma pero son de cadenas ligeras debido a que las cadenas constantes debido a su tamaño no se pueden filtrar por el riñón, las cadenas ligeras son las llamadas proteínas de Benses Jones