Este documento describe varias pruebas para identificar la presencia de carbohidratos (glúcidos) como almidón, azúcares y pentosas. La prueba de Molisch identifica todos los carbohidratos produciendo un color morado. La prueba de Fehling detecta la presencia de azúcares reductores mediante un cambio de color a rojo. La prueba de Seliwanoff específicamente identifica hexosas dando una reacción positiva para fructosa y sacarosa.
3. Fundamento
En la prueba de Molisch, se utiliza el acido sulfúrico en la
reacción de deshidratación (del monosacárido) y el alfa-
naftol en la reacción de condensación del furfural , al aplicar
esta prueba cualitativa , todos los carbohidratos o glúcidos
producen un complejo color morado
8. Utilidad
• Poner de manifiesto la presencia de azúcares
reductores en un medio, mediante una
reacción de color tipo redox
9. Fundamento
• Este ensayo pone de manifiesto la presencia de azucares
reductores (aldosas: glucosa, ribosa etc.). Se trata de una reacción
redox en la que el grupo aldehído (reductor) de los azúcares es
oxidado a grupo ácido por el Cu2+ que se reduce a Cu+ . Tanto los
monosacáridos como los disacáridos reductores reaccionan con el
Cu2+ dando un precipitado rojo de oxido cuproso. La reacción tiene
lugar en medio básico por lo que es necesario introducir en la
reacción tartrato sódico-potásico para evitar la precipitación del
hidróxido cúprico. La prueba de Fehling no es específica; otras
sustancias que dan reacción positiva son los fenoles, aminofenoles,
benzoína, ácido úrico, entre otras.
10. Procedimiento
• Se mezclan 1ml de las soluciones fehling A y fehling B en un
tubo de ensayo
• Se adiciona en el mismo tubo 1 ml de la solución problema
• La mezcla formada se agita y se lleva a calentamiento fuerte
en un baño térmico
11. Resultados
En la glucosa el grupo aldehído se encuentra libre y actúa como
reductor , algo semejante ocurre con la lactosa un disacárido
formado por glucosa y galactosa. Aquí el enlace se establece
entre el carbono 1 (el C del grupo aldehído) y el carbono cuatro
de la glucosa, de modo que la galactosa no tiene efecto reductor ,
pero si la glucosa pues su grupo aldehído no esta implicado en el
enlace.
13. Utilidad
• Esta es una prueba cualitativa ( el medio pasa de
incoloro a rojo) de reconocimiento especifica para
las hexosas (cetohexosas y aldohexosas)
14. Fundamento
En la prueba de seliwanoff, se utiliza acido clorhídrico en la reacción
de deshidratación (del monosacárido) y el resorcinol (1,3-
dihidroxibenceno) en la reacción de condensación del derivado del
furfural (hidroximetilfurfural). El hidroximetilfurfural (producto de la
deshidratación) se forma rápidamente a partir de cetohexosas, y
mas lentamente a partir de aldohexosas. El tratamiento prolongado-
de mas de 15 minutos de duración-, provoca la isomerización de la
glucosa (aldohexosa) en fructosa (cetohexosa), por lo que también la
glucosa puede dar prueba positiva. la sacarosa da una reacción
positiva debido a la hidrolisis acida de su enlace glicosidico, cuyos
productos son la D-glucosa y la D-fructosa
15. Procedimiento
• Se añaden 5 ml del reactivo de seliwanoff a 2ml de
la solución problema en un tubo de ensayo
• Se calienta la mezcal en un baño térmico
16. Resultados
Mediante la reacción de Seliwanoff se identificó los
diferentes azúcares dándonos una reacción positiva la
fructosa ya que es una cetosa y la sacarosa, esta ultima
esta formada por un monosacárido fructuosa que es una
cetosa, mientras que obtuvimos una reacción negativa en la
glucosa y lactosa lo que nos da a identificar que estos
azúcares son aldosas
18. Fundamento
El HCL del reactivo de Bial convierte a la pentosa en
furfural, la cual reacciona con orcinol para formar
un complejo verde, el alfa-naftol reacciona con el
furfural formando un complejo color violeta o
rosado
19. Procedimiento
• Se mezclan 5 ml del reactivo con 2 ml de la solución
problema
• Se calienta lentamente hasta ebullición en un baño
térmico
20. Resultado
Dependiendo el tipo de reactivo; la prueba dará positiva en
el caso del orcinol mediante una coloración verde y en el
caso de utilizar como reactivo floroglucinol mediante la
formación de una complejo color rojo o rosado
23. Desarrollo de la practica
• Se vierte en un tubo de ensayo un volumen determinado de
la solución problema (almidón)
• Luego se agregan dos gotas de solución de lugol
• La muestra se somete la muestra a un baño de maría y
posteriormente a un ambiente frio