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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LASALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICAY FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor:Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Daysi Ambuludi
Curso: Quinto Paralelo: A
Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 16 de junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 23 de junio del 2014
Grupo 3
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR METANOL
Animal de Experimentación: Cobayo
Vía de Administración: Vía Parenteral.
 OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
Distinguir la sintomatología de la intoxicación por metanol en el cobayo
Verificar mediante reacciones químicas la presencia de metanol en una muestra.
 MATERIALES:
 Soporte de hierro
 Pinza de nuez
 Vaso de precipitación 250ml
 Matraz Erlenmeyer 250ml
 Equipo de decisión
 Mangueras
 Balón de destilación
 Agitador
 Mechero de alcohol
 Tabla de disección
 Panema
 Jeringa de 10ml
 Probeta de 50ml
 Refrigerante
 SUSTANCIAS:
 Agua destilada
 Cloruro de fenilhidracina 4 %
 Nitroprusiato de sodio 2,5 %
 Hidróxido de sodio (NaOH) 0.1N
 Leche
 Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4)
 Cloruro férrico ( Cl3Fe )
 Ácido clorhídrico (HCl)
 Hidróxido de potasio 12 % (KOH)
 K3Fe (CN)6
 Formol
 Aceite mineral
 Ácido tartárico
 Metanol

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 Cinta de embalaje
 Aro de hierro
 Fosforo
 Piola
 Pipetas
 Pinza para tubos
 Funda plástica
 Tubos de ensayos
 Mandil
 Mascarilla
 Guantes de látex
 EQUIPOS:
 Balanza analítica
 PROCEDIMIENTO
1. Desinfectamos el área de trabajo y limpiamos los materiales que se emplean en la
práctica.
2. Preparamos la solución problema
3. Administramos 5ml Metanol 20ml por vía peritoneal
4. Colocamos el cobayo en la panema
5. Observamos las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo el cobayo
muere
6. Sacamos el cobayo del panema y lo colocamos en la tabla de disección
7. Sujetamos al animal sus extremidades en la tabla
8. Con la ayuda del bisturí procedemos abrirmos el cobayo
9. Observamos que órganos se afectaron por el metanol
10. Colocando las vísceras afectadas, en un vaso de precipitación, procediendo a
picar lo más fino posible
11. Añadimos un acidulante, previamente preparado (2 gr AC. Tartárico 2% +50ml
H2O destilada y agitamos) en la muestra (vísceras) y en matraz colocamos 20ml
NaOH 0.1N en el cual se recogió los vapores de metanol, emitidos tras la
destilación.
12. Armamos el equipo de destilación correctamente
13. Abrimos la llave para que empieza la destilación por 30 minutos
14. Una vez culminada la destilación, procedemos a transformar el metanol en
metanal
15. Calentamos al rojo vivo una lamina de cobre, introducimos en el destilado lo cual
repetimos varias veces, hasta que la lamina desprenda partículas grises en el
destilado
16. Obtenemos el metanal y procedemos a realizar las reacciones de reconocimiento.

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Reacciones de reconocimiento:
1. Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de
permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido
sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución
saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color
madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de
ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de
Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
2. Reacción de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de
fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién
preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul
intensa.
3. Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una
pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4
gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de
potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.
5. Con el Ácido Cromotrópico Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con
ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla
ligeramente.
6. Reacción de Hehner Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche,
se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro
férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona
de contacto se produce un color violeta o azul violeta.
 GRÁFICOS:
Preparación del Metanol
(CH3OH)
Colocación del Cobayo
En el panema
Administración del
Metanol primera dosis
(5ml)
Colocación del cobayo en el
panema una vez Adm. la
primera dosis
Administración del Metanol
segunda dosis
Colocación del cobayo en el
panema una vez Adm. la 2da
dosis

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Colocación del cobayo en el
panema una vez Adm. La 2da
dosis, se Adm una cuarta dosis
Administración del Metanol
tercera dosis
Muerte del cobayo a la 1h
20 minutos
Observación de los órganos
afectados por el tóxico
Trituración de las vísceras, y
acidulación con Ac. tartárico
Colocación de la mezcla
en el balón de destilación
Armado del equipo de
destilación
Preparación de cobayo en
la tabla para la disección
Raspado de la pelaje del
cobayo, para proceder a la
disección
Disección del animal con el
bisturí
Proceder a la destilación
durante 30 min.
Transformar el metanol en
metanal. Calentar al rojo una
lámina de Cu e introducirla en el
destilado- desprend. Partícula gris

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 REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
1) Reacción de Shiff:
Reacción Positivo no característico Cambio de coloración
2) Reacción de Rimini:
Reacción positivo no característico Cambio de coloración
3) Con la fenil hidracina:
1. Reacción positivo característico Coloración rojo grosella

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4) Con el ácido cromotrópico:
Reacción Negativo
5) Reacción de Hehner:
Reacción Negativo
 OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar Metanol ( CH3OH 20ml) por vía intraperitoneal al
cobayo, se presentaron las siguientes manifestaciones:
Inicio de administración metanol (5ml): Fue 8:25 am. Presentando Convulsiones leves,
respiración agitada, perdida de la movilidad motora.
Segunda administración Metanol (5ml) : Respiración lenta, parpadeos, inmovilidad en
sus extremidades.
Tercera dosis Metanol (5ml): Inmovilidad, hipoxia, convulsiones fuertes
Cuarta dosis Metanol (5ml): Respiración lenta, inmovilidad total en sus extremidades.

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Deceso: 9:45 am.
 CONCLUSIONES
Al concluir la práctica nos dimos cuenta cuales son las manifestaciones que presento el
cobayo ante la administración del toxico; el tiempo que tardo hacer efecto el toxico es de
1h 20 minutos lo cual se puede ver refleajdo por la caducidad que presenta el reactivo.
Afectando su aparato digestivo entre ellos: vesícula inflamada, intestino grueso, parte del
intestino delgado. Con lo que concluimos que el metanol es muy toxico debiéndose a la
vía de administración demoro en morir, y mediante las reacciones de reconocimiento de
este se puede concluir que si hubo presencia de metanol.
 RECOMENDACIONES
 Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar
posteriormente accidente alguno
 Al momento de administrar la dosis realizarlo en la vía correcta, para evitar de esta
manera provocar embolias.
 Preparar correctamente los reactivos a la concentración requerida en la práctica y
así mismo utilizar pipetas o bulbos para cada reactivo.
 Culminada la práctica se debe dejar el área desinfectada, para evitar
contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
 CUESTIONARIO
¿Cuáles son las manifestaciones clínicas que se presenta por intoxicación
de metanol?
El intervalo entre la ingesta y la aparición de las manifestaciones clínicas es variable (de
pocos minutos hasta 72 horas). En la mayoría de los casos los síntomas iniciales
(embriaguez, somnolencia y vértigo) se siguen de un periodo asintomático, especialmente
si el metanol se ingiere mezclado con etanol.
Concentraciones de etanol entre 100 y 150 mg/ml pueden retrasar la instauración de los
síntomas hasta que se haya metabolizado una cantidad suficiente de etanol como para
que el metanol empiece a transformarse en sus metabolitos tóxicos.
Sin embargo, incluso si el metanol se consume solo, pueden transcurrir de 12 a 24 horas
hasta que se produzcan concentraciones de metabolitos tóxicos en cantidad suficiente
como para producir síntomas.
¿Cómo se presenta el periodo de acidosis metabólica?
Se presenta aproximadamente de 12 a 30 horas después de la ingestión de alcohol
metílico. Los pacientes presentan gran variedad de síntomas, entre los cuales se
destacan cefalea, náuseas, vómito, dolor abdominal tipo cólico, mialgias y diarrea en
menor proporción,además el paciente puede presentar dificultad respiratoria con
taquipnea (respiración de Kussmaul), bradicardia e hipotensión, alteraciones del sistema
nervioso, debilidad muscular y convulsiones con mal pronóstico si estas se presentan.
Durante esta etapa se ha metabolizado el metanol a formaldehido y ácido fórmico,

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presentándose acidosis metabólica grave y desarrollo de desórdenes visuales. Si el
paciente no recibe tratamiento, el cuadro progresa y se presenta ceguera, colapso
circulatorio, convulsiones, coma y muerte debido a falla respiratoria.
¿Qué antídotos son utilizados inmediatamente para tratar una intoxicación
por metanol?
Una vez identificado el caso como intoxicación aguda por metanol, se debe iniciar el
tratamiento específico. Existen dos antídotos que actúan bloqueando la enzima alcohol
deshidrogenasa, el 4-methylpyrazole (fomepizole) y el alcohol etílico (etanol) .Cuando no
se dispone de ampollas de etanol absoluto se puede suministrar por vía oral una bebida
de alto contenido de éste alcohol (etanol), como el vodka, el whisky (45-50%) o el
aguardiente al 30%.
¿Cuál es el mecanismo de toxicidad del Metanol?
El metanol es metabolizado en el hígado, en la mitocondria del hepatocito, por la alcohol
deshidrogenasa a formaldehído y subsecuentemente por la aldehído-deshidrogenasa a
ácido fórmico. La acidosis sistémica es causada por el ácido fórmico y por el ácido láctico
que se genera por el estado de deterioro generalizado del paciente; mientras que la
ceguera es causada principalmente por el formato.
Tanto el etanol como el metanol compiten por la enzima alcohol-deshidrogenasa, aunque
esta enzima prefiere metabolizar el etanol (afinidad 20 veces mayor); por ello el
tratamiento para la intoxicación por metanol se basa en el uso de alcohol etílico
Además de los diagnósticos específicos que otros exámenes se realizan
para cuantificar y cualificar metanol en el organismo.
Incluyen electrolitos, glucosa, BUN, creatinina,osmolaridad sérica, gases arteriales,
brecha aniónica (anion gap), niveles de etanol y de lactato. También puede ser enviado al
laboratorio de toxicología analítica el alcohol o bebida alcohólica sospechosa para su
análisis.
¿Qué tratamiento y medidas de urgencia se debe realizar ante la intoxicación
por metanol?
Es primordial y principalmente evitar la degradación del metanol a formaldehído y a ácido
fórmico, además de extraer totalmente el tóxico y neutralizar sus efectos metabólicos.
Se debe rápidamente tomar medidas de urgencia para evitar que la intoxicación sea grave
y así poder salvar al paciente:
• Mantenimiento de la vía aérea y asistencia ventilatoria si es necesario.
• Control de temperatura, tensión arterial y pulso.
• Oxigenoterapia y vendaje ocular precoz.
• Tratamiento del coma y de convulsiones.
•Tratamiento de la acidosis metabólica con bicarbonato de sodio intravenoso (la
corrección de la acidosis debe ser guiada por gases arteriales).
¿Qué medidas de prevención se deben tomar para evitar la intoxicación por
metanol?

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Debido a que en la mayoría de los casos ésta intoxicación se presenta de manera
accidental se debe enfocar en las medidas de prevención como son:
• Brindar la protección adecuada a las personas que laboran en ambientes contaminados.
• Evitar el consumo de bebidas alcohólicas de dudosa procedencia.
• Erradicar la costumbre de friccionar con alcohol los niños que padecen de síntomas
generales como fiebre.
• Educar a la comunidad en general sobre el peligro y los cuidados de manejo del alcohol
industrial o alcohol de cocina o “reverbero”
Clasificación de la gravedad de intoxicación de acuerdo a los niveles de
metanol en la sangre.
Intoxicación leve: Metanolemia (metanol en sangre) menor de 10 mg/dL. Sensación de
fatiga,náuseas, epigastralgias, cefalea y visuales de percepción o acomodación.
Intoxicación moderada: Metanolemia entre 10-50 mg/dL. Vómitos, expresiones de
embriaguez, especialmente si la intoxicación es mixta (etanol-metanol), piel fría y
sudorosa, visión borrosa y se presenta taquipnea, tratando de hacer compensación
respiratoria de la acidosis metabólica.
Intoxicación severa: Metanolemia mayor de 50 mg/100 mg/dL. Paro comatoso,
respiración rápida y superficial, convulsiones, cianosis periférica y central,
hipotensión, edema de papila.
Las metanolemias superiores a 100 mg/dL se consideran letales
 Glosario
Metanolemia : Dosis elevada de metanol en la sangre.
Anión gap: El anión gap es la diferencia entre los aniones plasmáticos que habitualmente
no se miden (proteínas, sulfatos, fosfatos y ácidos orgánicos como lactato y piruvato) y
cationes plasmáticos que habitualmente no se miden (K+, Ca2+
, Mg2+
). El anion gap
normal es entre 8 - 12 mEq/l.
BUN: es la cantidad de nitrógeno circulando en forma de urea en el torrente sanguíneo;el
nitrógeno ureico es lo que se forma cuando la proteína se descompone
Respiración de Kussmaul :se caracteriza por ser profunda y forzada, este patrón respiratorio
estáasociadocon acidosismetabólicasevera, y particularmente con ketoacidosis diabética, pero
tambiénconinsuficienciarenal.Esunaforma de hiperventilaciónque colaboraconlareducciónde
dióxido de carbono en la sangre.
Mialgias: es un dolor que afecta a los músculos esqueléticos estriados, es decir, los
músculos que están bajo el control del sistema nervioso central, de control voluntario.
Fomepizol: es un inhibidor competitivo de la enzima alcohol deshidrogenasa, [5] que se
encuentra en el hígado. Esta enzima juega un papel clave en el metabolismo de glicol de
etileno y metanol.

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 BIBLIOGRAFÍA:
 NOGUÉ S. MARRUECOS L. Guía clínica para el tratamiento de las intoxicaciones por
metanol y etilenglicol. Indicaciones del fomepizol. Barcelona, 2006. .(Consultado el 19
deJunio del 2014). Disponible en:
http://www.fetoc.es/asistencia/Metanol_Etilenglicol_Fomepizol.pdf
 LORÍA J .BERMEO A. RAMÍREZ A. FERNÁNDEZ D. Archivos de Medicina de
Urgencia de México. Intoxicación por metanol, reporte de un caso. Mexico 2009 Vol.
(Consultado el 19 deJunio del 2014). Disponible en:
http://www.medigraphic.com/pdfs/urgencia/aur-2009/aur092f.pdf
 GUTIERREZ M. GUÍAS PARA MANEJO DE URGENCIAS CAPITULO XII
INTOXICACION POR METANOL(Consultado el 19 deJunio del 2014). Disponible en:
http://www.bio-nica.info/Biblioteca/Gutierrez-Intoxicacion-Metanol.pdf
 URREGO J. VIGILANCIA Y CONTROL EN SALUD PÚBLICA .PROTOCOLO DE
VIGILANCIA Y CONTROL DE INTOXICACIONES POR METANOL. (Consultado el 19
deJunio del 2014). Disponible en:
http://www.ipsunipamplona.com/es/images/notas/PDF/INTOXICACIONES%20POR%2
0METANOL.pdf
 FIRMAS DE RESPONSABILIDAD:
Daysi Ambuludí ------------------------------------
Khatherine Cayambe -------------------------------
Nelly Cepeda -----------------------------------------

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ANEXOS
Toxico utilizado en la práctica (METANOL)
Animal en el cual se experimentó ( Cobayo )
Resultados de las reacciones realizadas en la práctica