Recommended
Recommended
More Related Content
Featured
Featured (20)
Ge3 p economic botany and plant biotechnology
- 1. Presented by: DR. PAMPI GHOSH 18/01/2022 Assistant Professor & Head, Department of Botany, Seva Bharati Mahavidyalaya, Kapgari, Jhargram, West Bengal Email: pampikapgari@gmail.com SEM âUG-CBCS- BOTANY (Gen.) Vidyasagar University, Midnapore, W.B. GE3P: Economic Botany and Plant Biotechnology Unit 10 Recombinant DNA Techniques: (Blotting techniques: Northern, Southern and Western Blotting, DNA Fingerprinting; Molecular DNA markers i.e. RAPD, RFLP, SNPs; DNA sequencing, PCR and Reverse Transcriptase-PCR. Hybridoma and monoclonal antibodies, ELISA and Immuno detection. Molecular diagnosis of human disease, Human gene Therapy.) Lecture-10 Link:
- 2. GE3P: Economic Botany and Plant Biotechnology Unit 10 Recombinant DNA Techniques: Blotting techniques: Northern, Southern and Western Blotting, DNA Fingerprinting; Molecular DNA markers i.e. RAPD, RFLP, SNPs; DNA sequencing, PCR and Reverse Transcriptase-PCR. Hybridoma and monoclonal antibodies, ELISA and Immuno detection. Molecular diagnosis of human disease, Human gene Therapy.
- 3. āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ âĸ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ, āĻŽāĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻāĻŋāĻžāĻ° biology āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻā§āĻ¨ā§āĻāĻ¨ā§, āĻāĻ°āĻžāĻā§, āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻŦāĻž āĻāĻ°āĻā§āĻāĻ¨āĻŋ āĻŋāĻ¯āĻžāĻ˛āĻ°āĻ¯āĻžāĻ¨āĻ° āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ° āĻŋāĻ°āĻžāĻ° āĻāĻŋāĻ āĻĒāĻĻā§āĻ§āĻ˛āĻŋ (āĻāĻĻāĻžāĻšāĻ°āĻŖāĻ¸ā§āĻŦāĻ°ā§āĻĒ, āĻāĻŋāĻ ā§āĻžāĻāĻ¨āĻ°āĻžāĻ¨ā§āĻŋā§āĻ¨āĻŋāĻžā§, āĻĒāĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ˛ā§āĻŋāĻžāĻāĻ˛āĻŋā§ āĻāĻ˛āĻžāĻ°āĻžāĻāĻŋ āĻŦāĻž ā§āĻžāĻāĻŋā§ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋ)āĨ¤ āĻ āĻ¨ā§āĻŋ āĻā§āĻ¨ā§, āĻāĻ āĻāĻŋāĻ āĻā§āĻŋ āĻāĻ¨āĻŋāĻ¨āĻ°āĻžāĻ¨ āĻžāĻ°āĻ˛ā§āĻ¨ā§āĻ° āĻĒāĻ¨āĻ° āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯, āĻā§āĻŋ āĻā§āĻ¨āĻŋ āĻ āĻŖā§āĻā§āĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻŽāĻŽāĻ¨ā§āĻ¨ā§ āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ° āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻ āĻ¨ā§āĻŋāĨ¤ ā§āĻŽāĻ¯ ā§āĻŽā§ā§āĻžāĻā§āĻ˛āĻŋ ā§āĻ°āĻžā§āĻ˛āĻ° āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋ āĻ¯ā§āĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻŋāĻ°āĻžāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ°, āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ˛āĻ°āĻŋ āĻāĻ°āĻžāĻā§, āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻŦāĻž āĻāĻ°āĻā§āĻāĻ¨āĻŋ āĻāĻĻāĻāĻž ā§āĻŽā§āĻāĻŦ āĻšāĻ¯ colourant stain āĻĻā§āĻŦāĻžāĻ°āĻž (āĻāĻĻāĻžāĻšāĻ°āĻŖāĻ¸ā§āĻŦāĻ°ā§āĻĒ, āĻāĻ˛ā§āĻ˛āĻŋāĻ¯āĻžāĻŽ āĻā§āĻžāĻŽāĻžāĻāĻŋ, āĻ˛āĻŋāĻ¸ā§āĻāĻžāĻŋ āĻŋāĻžāĻ¨āĻ¯āĻžāĻ¨āĻŋāĻ, ā§āĻž āĻ°āĻžā§āĻžāĻā§ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻ ā§āĻ˛āĻŽāĻ¯āĻžāĻŽ āĻāĻāĻ¨āĻ°āĻžā§āĻžāĻāĻŋ āĻāĻŋāĻ¯āĻžāĻ˛āĻĻ āĻŦāĻž āĻāĻ°āĻžāĻāĻ¨ā§āĻ° silver staining), āĻāĻ°āĻ˛āĻŋāĻāĻ¨āĻŋāĻ¨āĻŦāĻŋāĻ¯ā§āĻā§āĻ¤ āĻ āĻŖā§āĻ° āĻ āĻ¨āĻāĻžāĻ¨āĻ°āĻ˛āĻŋāĻāĻā§āĻ°āĻžāĻ˛ āĻŋ āĻ˛āĻŋā§ā§āĻ¯āĻ¯āĻžāĻŋāĻžāĻāĻ¨ā§āĻļā§ āĻĻā§āĻŦāĻžāĻ°āĻž (āĻŦā§āĻ˛āĻ āĻŋāĻ°āĻžāĻ° āĻāĻ¨ā§ ā§āĻŽā§āĻĒāĻžāĻ˛āĻĻāĻŋ), āĻŦāĻž āĻ˛āĻŋāĻā§ āĻāĻ°āĻžāĻā§ āĻŦāĻž āĻ˛ā§āĻāĻ˛āĻŋāĻŋ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛ā§āĻ¨āĻŋāĻ° āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻāĻŋāĻ¨āĻŦāĻ˛āĻŋāĻŋāĻāĻ¨āĻ¯āĻ° āĻŽāĻžāĻ§ā§āĻ¯āĻ¨āĻŽ āĨ¤
- 5. Instrument/materials used for Blotting
- 6. DNA, RNA and Protein Structures
- 7. Probe
- 8. RNA Probe
- 10. āĻ°āĻŋāĻžāĻ°āĻ¨āĻŋāĻĻ âĸ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻ° āĻ°āĻŋāĻžāĻ°āĻ¨āĻŋāĻĻ āĻŽā§āĻŋāĻŋ 3 āĻ§ā§āĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻ°āĻ¨āĻ¯āĻ¨āĻ: 1) āĻĻāĻ˛ā§āĻŖ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ (Southern blotting) 2) āĻāĻ¤ā§āĻ¤āĻ° āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ (Northern blotting) 3) āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ (Western blotting)
- 11. ā§āĻžāĻāĻĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ âĸ ā§āĻžāĻāĻĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻ° ā§āĻžāĻŽāĻŋāĻ°āĻŖ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¨āĻ¯āĻ¨āĻ āĻāĻŋāĻāĻ¯āĻžāĻŋ āĻŋ āĻāĻŽ ā§āĻžāĻāĻĻāĻžāĻ¨ā§āĻŋāĻ° (Edward M. Southern) ā§āĻžāĻ¨āĻŽāĨ¤ āĻāĻ āĻĒāĻĻā§āĻ§āĻ˛āĻŋāĻ DNA āĻŋāĻŽ āĻ˛āĻŦāĻ¨ā§āĻˇāĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻāĻāĻžāĻ¨ā§ āĻ˛ā§āĻŽā§āĻ¨āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻāĻŋ āĻĒāĻĻāĻ¨ā§āĻĒāĻā§āĻ˛āĻŋ āĻā§āĻāĻ¯āĻž āĻšāĻ¯ : âĸ āĻ°ā§āĻŽāĻŋ, āĻŦāĻĄāĻŧ āĻā§ā§āĻ¯ā§āĻā§āĻ¤ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ ā§ā§āĻŽāĻžāĻŦāĻĻā§āĻ§āĻŋāĻž āĻāĻ¨āĻĄāĻžāĻ˛ā§āĻāĻ˛āĻŋā§ (Restriction endonucleases) āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ¨āĻ° āĻāĻāĻžāĻ āĻāĻāĻžāĻ āĻā§ āĻŋāĻ¨āĻ°āĻž āĻā§ āĻŋāĻ¨āĻ°āĻž āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻŋāĻžāĻ°āĻĒāĻ¨āĻ°, āĻāĻ āĻā§ āĻŋāĻ¨āĻ°āĻžāĻā§āĻ˛āĻŋ āĻāĻŋāĻžāĻĻāĻž āĻŋāĻ°āĻžāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻā§āĻŋ āĻāĻ¨āĻŋāĻ¨āĻ°āĻžāĻ¨ āĻžāĻ¨āĻ°āĻ˛ā§ā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻ¯āĻžāĻ¨āĻŋ āĻŋāĻžāĻ°āĻž āĻŋāĻžāĻ¨āĻĻāĻ° āĻāĻŋāĻžāĻ° āĻ ā§ā§ā§āĻžāĻ¨āĻ° āĻāĻŋāĻžāĻĻāĻž āĻšāĻ¨āĻŋ āĻĒāĻžāĻ¨āĻ°āĨ¤ âĸ āĻ¯āĻ˛āĻĻ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻāĻŖā§āĻĄāĻā§āĻ˛āĻŋ āĻāĻŋāĻžāĻ¨āĻ° āĻ āĻ¨ā§āĻŋ āĻŦāĻĄāĻŧ āĻšāĻ¯, āĻŋāĻžāĻšāĻ¨āĻŋ āĻ°ā§āĻ¨āĻŽ āĻā§āĻŋāĻāĻ¨āĻŋ HCl āĻ˛āĻĻāĻ¨āĻ¯ treat āĻŋāĻ°āĻž āĻāĻ˛āĻŋāĻŋ, āĻ¯āĻž āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻā§ āĻŋāĻ¨āĻ°āĻžāĻā§āĻ˛āĻŋāĻ° āĻ˛āĻŦāĻļā§āĻĻā§āĻ§āĻŋāĻž āĻāĻāĻžāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻāĻ āĻā§ āĻŋāĻ¨āĻ°āĻžāĻā§āĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋ āĻāĻŋāĻžāĻĻāĻž āĻŋāĻ°āĻžāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ°, āĻāĻŋāĻžāĻĻāĻž āĻŋāĻ°āĻž āĻā§āĻ¨āĻŋāĻ° āĻāĻĒāĻ¨āĻ° āĻāĻŋāĻ ā§āĻžāĻāĻ¨āĻ°āĻžāĻ¨ā§āĻŋā§āĻ¨āĻŋāĻžā§ āĻļā§āĻ āĻ°āĻžāĻāĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ° āĻāĻĒāĻ° āĻŋāĻžāĻĒ āĻ°āĻ¨āĻ¯āĻžā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻ¯āĻžāĻ¨āĻŋ āĻāĻ āĻĻā§āĻāĻ° āĻŽāĻ¨āĻ§ā§āĻ¯ ā§āĻ āĻŋāĻŋ āĻ˛āĻŽā§āĻ˛āĻŋāĻ¯āĻž āĻāĻāĻ¨āĻŋ āĻĒāĻžāĻ¨āĻ°āĨ¤ âĸ āĻāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ° āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ āĻ āĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŦāĻā§ā§ā§ āĻ˛āĻŦāĻ˛āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° ā§āĻŋāĻāĻ¸ā§āĻĒāĻ¨āĻļāĻŋ āĻ°āĻžāĻāĻž āĻšāĻ¯ āĻ¯āĻžāĻ¨āĻŋ āĻā§ āĻŋāĻ¨āĻ°āĻžāĻā§āĻ˛āĻŋ āĻ¸ā§āĻĨāĻžāĻ¯ā§āĻŋāĻžāĻ¨āĻŦ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ° ā§āĻžāĻ¨ā§ ā§āĻŋāĻāĻ¯ā§āĻā§āĻ¤ āĻšāĻ¨āĻŋ āĻĒāĻžāĻ¨āĻ°āĨ¤ âĸ āĻŋāĻžāĻ°āĻĒāĻ° āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋ āĻšāĻžāĻāĻ˛ā§āĻŋāĻžāĻāĻ¨ā§āĻļā§ āĻāĻ°āĻžāĻ¨āĻŦāĻ° ā§āĻŋāĻāĻ¸ā§āĻĒāĻ¨āĻļāĻŋ āĻā§ āĻšāĻ¯ āĨ¤ āĻ˛āĻŋāĻ¨ā§āĻ¤ā§ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻāĻ°āĻžāĻŦāĻ¨āĻŋ āĻāĻŋāĻ¨āĻŦāĻŋ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻ¯āĻžāĻ¨āĻŋ āĻāĻ ā§āĻšāĻ¨ā§āĻ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻž āĻ¯āĻžāĻ¯ , āĻ¯āĻā§ āĻ āĻŖā§āĻāĻ¨āĻŋ āĻāĻŋāĻ āĻāĻŋāĻžāĻ¨āĻŽāĻžāĻ¨ā§āĻ˛ā§āĻŋ āĻŋāĻžāĻ (Chromogenic dye) āĻ˛āĻĻāĻ¨āĻ¯ āĻāĻ¯āĻžā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻšāĻžāĻāĻ˛ā§āĻŋāĻžāĻāĻ¨ā§āĻļā§ āĻ°āĻ˛āĻŋāĻ¯āĻžāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ°, āĻā§āĻā§āĻ˛ā§( SSC buffer) āĻŦāĻž āĻžāĻ° āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ¨āĻ° āĻ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻ°āĻā§āĻ¤ āĻāĻ°āĻžāĻŦ āĻ§ā§ā§āĻ¨āĻ¯ āĻ āĻŋāĻž āĻšāĻ¯ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻāĻ āĻ āĻ¨āĻāĻžāĻ¨āĻ°āĻ˛āĻŋāĻāĻā§āĻ°āĻžāĻ˛ āĻ° ā§āĻžāĻšāĻžāĻ¨āĻ¯āĻ¯ āĻā§-āĻāĻ° āĻ˛ āĻ¨ā§ āĻ˛āĻŋā§ā§āĻ¯āĻ¯āĻžāĻŋāĻžāĻā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻ¯āĻžāĻ¯āĨ¤
- 12. ā§āĻžāĻāĻĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻ° āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋāĻļā§: i) āĻāĻ RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) āĻŽāĻ¯āĻžāĻ˛āĻĒāĻŋāĻ ā§āĻžāĻŽāĻŋ āĻāĻŋā§āĻļāĻ¨āĻŋ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ ii) āĻžāĻāĻ¨āĻŋāĻžāĻ¨ā§āĻ¨ā§āĻāĻŋ āĻ˛āĻŦāĻ¨ā§āĻˇāĻ¨āĻŖāĻ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ iii) āĻ˛ā§āĻ¨ā§āĻ° āĻĒā§ā§āĻ˛āĻŦāĻŋā§āĻ¯āĻžā§ āĻļā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻžāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤
- 13. ā§ā§āĻŋāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ (Northern blotting): āĻāĻ¤ā§āĻ¤āĻ° āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ ā§āĻžāĻŽāĻ āĻ āĻ¯āĻžāĻŋāĻāĻ¯āĻžāĻā§ (Alwine) āĻ°ā§āĻŽ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ¨āĻ°ā§āĨ¤ āĻāĻ āĻĒāĻĻā§āĻ§āĻ˛āĻŋāĻ āĻāĻŋāĻ ā§āĻŽā§ā§āĻžāĻ¯ āĻāĻ°āĻā§āĻ āĻ˛āĻŦāĻ¨ā§āĻˇāĻŖ āĻāĻŦāĻŋāĻ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻāĻāĻžāĻ¨ā§ āĻ˛ā§āĻŽā§āĻ¨āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻāĻŋ āĻĒāĻĻāĻ¨ā§āĻĒāĻā§āĻ˛āĻŋ āĻā§āĻāĻ¯āĻž āĻšāĻ¯: âĸ āĻ°ā§āĻŽāĻŋ, āĻāĻŋāĻžāĻˇ āĻā§āĻ¨āĻŋ āĻāĻŽāĻāĻ°āĻā§āĻ (mRNA) āĻāĻŋ āĻāĻŋāĻžāĻĻāĻž āĻŋāĻ¨āĻ° āĻ˛āĻŦāĻļā§āĻĻā§āĻ§ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻšāĻ¨āĻŦāĨ¤ âĸ RNA āĻāĻŋ āĻĒā§ā§āĻŋ āĻŋāĻ°āĻžāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻ˛āĻŋā§āĻžāĻŋāĻžāĻ˛āĻ°āĻŋāĻ āĻāĻ¨ā§āĻ¨ā§āĻ āĻ˛āĻšā§āĻžāĻ¨āĻŦ āĻŽāĻŋāĻžāĻŋāĻ˛āĻŋāĻšāĻžāĻāĻŋ āĻ¯ā§āĻā§āĻ¤ āĻ āĻ¯āĻžā§āĻžāĻ¨āĻ°āĻžā§ āĻā§āĻŋ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĨ¤
- 14. ā§ā§āĻŋāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ âĸ āĻāĻ āĻā§āĻŋāĻ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻĒāĻāĻ˛āĻ°āĻ¨ā§āĻļā§ āĻŦāĻž āĻžāĻ¨āĻ° 5- 10 āĻ˛āĻŽāĻ˛ā§āĻ¨āĻāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻŋā§ āĻ˛āĻŦāĻ¨āĻ¯ āĻ°āĻžāĻāĻž āĻšāĻ¯ āĻāĻŦāĻŋāĻ ā§āĻŋ āĻ˛āĻĻāĻ¨āĻ¯ āĻ§ā§ā§āĻ¨āĻ¯ āĻ āĻŋāĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻŋāĻžāĻ°āĻĒāĻ¨āĻ° āĻāĻ āĻāĻ°āĻā§āĻ āĻāĻŖā§āĻĄāĻā§āĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋ āĻŋāĻ¯āĻžāĻ˛āĻ°āĻ¯āĻžāĻ° āĻāĻŽāĻŽāĻ¨ā§āĻ¨ā§ āĻ ā§āĻŋāĻžā§ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻŽāĻ¨ā§āĻž - āĻāĻŦā§ā§āĻžāĻāĻŋ - āĻ āĻ˛ā§āĻ˛āĻŽā§āĻžāĻāĻŋ āĻ˛ āĻ˛ā§āĻāĻžāĻ° āĻāĻĒāĻĒāĻžāĻ¨āĻ° āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ˛āĻ°āĻŋ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻāĻ°āĻā§āĻ āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ° āĻŋāĻ°āĻžāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ°, āĻāĻ UV āĻŦāĻž āĻŋāĻžāĻĒ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ¨āĻ° āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋ ( membrane ) āĻ˛āĻ¸ā§āĻĨāĻ° āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻšāĻžāĻāĻ˛ā§āĻŋāĻžāĻāĻ¨ā§āĻļāĻ¨ā§āĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻāĻŋāĻ¨āĻŦāĻŋāĻ¯ā§āĻā§āĻ¤ āĻāĻ°āĻžāĻŦ āĻāĻ¯āĻžā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĨ¤ âĸ āĻā§āĻŦāĻžāĻāĻĄ āĻāĻ°āĻžāĻŦ āĻ§ā§ā§āĻ¨āĻ¯ āĻ āĻ¨āĻŋ āĻāĻļāĻ¨āĻˇ āĻāĻŽāĻāĻ°āĻā§āĻ-āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻšāĻžāĻāĻ˛ā§āĻŋ āĻāĻŋ āĻā§- āĻāĻ° āĻ˛ ā§ āĻĻā§āĻŦāĻžāĻ°āĻž ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤
- 15. ā§ā§āĻŋāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻ° āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋāĻļā§: âĸ Applications: i) āĻāĻ¤ā§āĻ¤āĻ° āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻŋāĻ ā§āĻŋāĻāĻ¨āĻŦāĻĻā§āĻļā§āĻŋ āĻĒāĻ°ā§ā§āĻž āĻ˛āĻšā§āĻžāĻ¨āĻŦ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻāĻŖā§āĻĄāĻā§āĻ˛āĻŋāĻ° āĻ°āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ˛āĻĒ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻ¯āĻž āĻĻāĻ˛ā§āĻŖ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ-āĻ āĻāĻŋāĻ āĻāĻ°āĻžāĻŦ āĻ˛āĻšā§āĻžāĻ¨āĻŦ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ ii) āĻāĻ āĻ˛āĻŦāĻ˛āĻŋāĻ¨ā§āĻ¨ āĻā§ā§āĻ¯ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻ˛āĻŦāĻ˛āĻŋāĻ¨ā§āĻ¨ ā§ā§āĻŦāĻ¨ā§āĻ¤ āĻ°āĻžāĻŖā§ āĻā§āĻ¨āĻŋ āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻāĻŽāĻāĻ°āĻā§āĻ (m RNA)ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤āĻŋāĻ°āĻŖ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻĒāĻ˛āĻ°āĻŽāĻžāĻŖ āĻ˛ā§āĻ§ā§āĻŋāĻžāĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° āĻ ā§ā§āĻŽāĻ˛āĻŋ āĻāĻĻāĻ¯āĨ¤
- 16. āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ (Western blotting) âĸ āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ (Western blotting) āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻ° ā§āĻžāĻŽāĻŋāĻ°āĻŖ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¨āĻ¯āĻ¨āĻ āĻŋāĻ˛āĻŦā§āĻ˛āĻ āĻ˛ā§āĻŋ āĻŦāĻžāĻ¨ā§āĻŋāĻ¨āĻāĻ° (W. Neal Burnette) ā§āĻžāĻ¨āĻŽāĨ¤ āĻāĻ āĻĒāĻĻā§āĻ§āĻ˛āĻŋāĻ āĻāĻŋāĻ āĻ°āĻĻāĻ¤ā§āĻ¤ ā§āĻŽā§ā§āĻžāĻ¯ āĻāĻ°āĻžāĻā§ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤āĻŋāĻ°āĻŖ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻ˛āĻŦāĻ¨ā§āĻˇāĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤
- 17. steps
- 18. āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻĒāĻĻāĻ¨ā§āĻĒāĻā§āĻ˛āĻŋ âĸ āĻāĻāĻžāĻ¨ā§ āĻ˛ā§āĻŽā§āĻ¨āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻāĻŋ āĻĒāĻĻāĻ¨ā§āĻĒāĻā§āĻ˛āĻŋ āĻā§āĻāĻ¯āĻž āĻšāĻ¯ : âĸ āĻ°ā§āĻŽāĻŋ, āĻ˛āĻŦāĻ¨āĻļāĻˇ ā§āĻŽā§ā§āĻž āĻā§āĻ¨āĻŋ āĻāĻ°āĻžāĻā§ āĻ˛āĻŦāĻ˛āĻŋāĻ¨ā§āĻ¨ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻā§āĻŋ electrophoresis āĻĒāĻĒāĻĻā§āĻ§āĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋāĨ¤ âĸ āĻāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ° āĻāĻ°āĻžāĻā§ ā§āĻžā§āĻ¨āĻĒā§āĻļāĻ¨ā§ āĻ˛āĻŦāĻāĻž-āĻŽāĻžāĻ°āĻŋāĻžāĻĒāĻ¨āĻāĻžāĻ¨ā§ā§āĻŋ ( beta- mercaptoethanol (BME) āĻ˛āĻŦāĻāĻŽāĻ) āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻā§āĻžāĻ˛āĻŋāĻ¯āĻžāĻŽ āĻāĻŋāĻžāĻ¨āĻŋāĻ˛ā§āĻŋ ā§āĻžāĻŋāĻ¨ āĻ ( Sodium dodecyl Sulfate (SDS) āĻā§āĻ˛āĻŋāĻā§) āĻāĻ¯āĻžā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻŋāĻžāĻ°āĻĒāĻ°, āĻāĻ°āĻžāĻā§-āĻā§āĻ˛āĻŋāĻā§ āĻŋāĻŽāĻ¨āĻŋā§āĻ āĻā§āĻ¨āĻŋāĻ° āĻā§āĻ¨āĻĒāĻ° āĻāĻĒāĻ¨āĻ° āĻ¸ā§āĻĨāĻžāĻĒā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻ ā§āĻ¯āĻžā§āĻ¯ āĻāĻ°āĻžāĻāĻ¨ā§āĻ° āĻāĻŖāĻ˛āĻŦāĻŋ āĻā§ā§ āĻ˛ā§āĻ§ā§āĻŋāĻžāĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻāĻŋāĻ āĻāĻŖāĻ˛āĻŦāĻŋ āĻā§ā§ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻŋāĻŋāĻžāĻ°ā§āĻ (molecular weight marker) āĻāĻŋāĻ āĻā§āĻ¨āĻĒ āĻāĻŋāĻžāĻŋ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ° āĻā§āĻ¨āĻŋāĻ° āĻ āĻŦāĻ˛āĻļāĻˇā§āĻ āĻā§āĻ¨āĻĒ ā§āĻŽā§ā§āĻž āĻāĻ¯āĻžā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻāĻŋāĻŦāĻžāĻ° ā§āĻŽā§ā§āĻž āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻŽāĻžāĻŋāĻŋ āĻžāĻ° āĻāĻŋāĻžāĻŋ āĻšāĻ¨āĻ¯ āĻā§āĻ¨āĻŋ āĻā§āĻŋ āĻāĻ° āĻŽāĻ¨āĻ§ā§āĻ¯ āĻ˛āĻĻāĻ¨āĻ¯ āĻŋāĻžāĻ¨āĻ°āĻ¨ā§āĻ āĻŋāĻžāĻŋā§āĻž āĻŋāĻ° āĻšāĻ¯ āĨ¤āĻ¨āĻ°āĻžāĻā§ āĻā§āĻ¨āĻĒāĻ° āĻ§ā§ā§āĻžāĻ¤ā§āĻŽāĻŋ āĻāĻŽāĻ°ā§āĻ¨āĻŋ ā§āĻŽā§ āĻŋāĻ¨āĻ° āĻŋāĻžāĻ°āĻŖ āĻāĻ āĻļāĻā§āĻ¤āĻŋāĻžāĻ¨āĻŦ SDS āĻāĻ° ā§āĻžāĻ¨ā§ āĻāĻŦāĻĻā§āĻ§ ā§āĻžāĻ¨āĻŋ āĻ¯āĻž āĻā§āĻ˛āĻŋāĻŦāĻžāĻŋāĻŋāĻŋāĻžāĻ¨āĻŦ (negatively) āĻŋāĻžā§ āĻŋ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻāĻ°āĻžāĻāĻ¨ā§āĻ° āĻŋāĻŋāĻžāĻŋāĻŋ āĻŋāĻžāĻ° āĻāĻŋāĻžāĻ¨āĻ°āĻ° āĻ˛āĻŦāĻĒāĻ°ā§āĻŋāĻŋāĻžāĻ¨āĻŦ ā§āĻŽāĻžā§ā§āĻĒāĻžāĻ˛āĻŋāĻŋ (inversely proportional)āĨ¤ âĸ.āĻāĻ āĻ§ā§āĻžāĻ¨āĻĒāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ°, āĻā§āĻŋāĻ āĻāĻŋāĻ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ° āĻāĻĒāĻ° āĻ¸ā§āĻĨāĻžāĻĒā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻā§āĻŋ ā§ā§āĻ¨āĻĄāĻŧ āĻŋāĻžāĻ¨āĻ°āĻ¨ā§āĻ āĻāĻ°āĻ°āĻŖ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻ¯āĻžāĻ¨āĻŋ ā§āĻŽāĻ¸ā§āĻ¤ āĻāĻ°āĻžāĻā§ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋ āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ˛āĻ°āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻŋāĻžāĻ°āĻĒāĻ° āĻāĻ˛āĻŽāĻāĻ¨ā§āĻžāĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻāĻ āĻĒāĻĻā§āĻ§āĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋ, āĻ°ā§āĻ¨āĻŽ āĻ -āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻāĻ°āĻžāĻā§ āĻāĻ° ā§āĻ¨ā§ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋ āĻāĻŋ āĻŦāĻĻā§āĻ§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻ¯āĻžāĻ¨āĻŋ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋ āĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻ° ā§āĻžāĻ¨ā§ āĻāĻŦāĻĻā§āĻ§ āĻšāĻ¨āĻŋ ā§āĻž āĻĒāĻžāĻ¨āĻ° āĻāĻ¯āĻāĻžāĻ¨ā§ āĻāĻ°āĻžāĻā§ āĻŦāĻŋāĻŋ āĻŽāĻžā§ āĻā§āĻāĨ¤ âĸ āĻŋāĻžāĻ°āĻĒāĻ° āĻ°āĻžā§āĻ˛āĻŽāĻŋ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋ āĻĻā§āĻ°āĻŦāĻ¨āĻŖ āĻāĻ¯āĻžā§ āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻāĻ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋāĻā§āĻ˛āĻŋ āĻāĻŋāĻ āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻŽāĻ¨ā§āĻž- āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛ā§āĻŋ āĻŋāĻŽ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ ā§ā§āĻŽ āĨ¤ āĻŋāĻžāĻ°āĻĒāĻ° āĻā§-āĻŦāĻžāĻāĻĄ āĻ°āĻžā§āĻ˛āĻŽāĻŋ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋ āĻ āĻĒā§āĻžāĻ°āĻŖ āĻ āĻā§āĻ¨āĻŋāĻĄāĻžāĻ˛āĻ° āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋ āĻāĻ¯āĻžā§ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻāĻ āĻ§ā§ā§āĻ¨āĻ¯ āĻ˛ā§āĻ¨āĻŋ āĻšāĻ¨āĻŦāĨ¤ âĸ āĻāĻā§ āĻāĻ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋāĻā§āĻ˛āĻŋ āĻāĻŋāĻ āĻā§ā§āĻžāĻāĻ¨āĻŽāĻ° ā§āĻžāĻ¨ā§ ā§āĻŋāĻāĻ¯ā§āĻā§āĻ¤ āĻšāĻ¯ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻ°āĻžā§āĻ˛āĻŽāĻŋ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋ āĻ˛āĻŋā§āĻ¨āĻŋ ā§ā§āĻŽ āĻšāĻ¯ āĨ¤ ā§āĻŦāĻ¨āĻļāĻ¨āĻˇ, āĻā§āĻŦāĻžāĻāĻĄ āĻā§āĻ¨āĻŋāĻĄāĻžāĻ˛āĻ° āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋ āĻ āĻĒā§āĻžāĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻāĻ¨āĻ°āĻŋ āĻŦāĻžāĻ° āĻāĻ§ā§āĻžāĻ¯āĻž āĻšāĻ¯āĨ¤ âĸ āĻāĻāĻžāĻ¨ā§, āĻāĻŋāĻ˛āĻŽāĻŋā§āĻ˛āĻŽāĻ¨ā§āĻ¨ā§āĻ¨ā§āĻ ā§āĻžāĻŦāĻ¨ā§āĻ āĻāĻ°āĻžāĻā§ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ ā§āĻžāĻŦāĻ¨ā§āĻ āĻāĻ¯āĻžā§ āĻŋāĻ°āĻžāĻ° āĻĒāĻ¨āĻ° āĻāĻ¨āĻŋāĻž āĻ˛ā§ā§āĻŋāĻŋ āĻšāĻ¨āĻŋ āĻāĻĻāĻ¨āĻ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻ˛ ā§ āĻāĻ¨āĻŽā§āĻžāĻ° āĻ˛āĻĻāĻ¨āĻ¯ āĻāĻ°āĻžāĻā§āĻ¨āĻŋ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻž āĻāĻ¯āĻ¨āĻŋ āĻĒāĻžāĻ¨āĻ°āĨ¤
- 19. âĸ āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻ° āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻŋāĻ¨āĻŋāĻļā§: i) āĻ˛āĻŋāĻ˛ā§āĻŋāĻžāĻŋ āĻāĻ¨ā§āĻ¨āĻļāĻ¯ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻāĻ āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ āĨ¤ ii) āĻŋāĻŽ āĻĒāĻ˛āĻ°āĻŽāĻžāĻ¨āĻŖ āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻāĻ°āĻžāĻā§ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ iii) āĻāĻŋāĻ āĻ˛ā§ā§ āĻāĻ¤ā§āĻĒāĻĻāĻ¨ā§ā§Ļ āĻĒāĻ˛āĻ°āĻŽāĻžāĻŖ āĻ˛ā§āĻ§ā§āĻŋāĻžāĻ°āĻŖ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤
- 20. āĻāĻĒā§āĻŋāĻāĻšāĻžāĻ° âĸ āĻāĻĒā§āĻŋāĻāĻšāĻžāĻ° āĻ˛āĻŦāĻ˛āĻŋāĻ¨ā§āĻ¨ āĻ§ā§āĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° āĻŽāĻ¯āĻžāĻ¨āĻŋāĻžāĻ¨āĻŽāĻžāĻ˛āĻŋāĻ˛āĻŋāĻāĻŋ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻ˛āĻŦāĻ˛āĻŋāĻ¨ā§āĻ¨ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻāĻ¯āĻŽā§ āĻĻāĻ˛ā§āĻŖā§ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻŋāĻ°āĻž āĻšāĻ¯ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻ˛āĻŦāĻ¨ā§āĻˇāĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯, āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻ°āĻžāĻā§ āĻ˛āĻŦāĻ¨ā§āĻˇāĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯, āĻāĻ¤ā§āĻ¤āĻ° āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻāĻ āĻāĻ°āĻā§āĻ āĻ˛āĻŦāĻ¨ā§āĻˇāĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯āĨ¤
- 21. āĻĒāĻžā§āĻŋāĻŋāĻ¯: ā§āĻžāĻāĻĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ / ā§ā§āĻŋāĻžā§ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ / āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻ¸āĻžāĻāĻĻāĻžāĻ°ā§āĻ¨ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻ°ā§āĻ°ā§āĻ¨āĻžāĻ°ā§ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻāĻ¨āĻ¯āĻ¸ā§āĻāĻžā§āĻŋ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻāĻ° āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻŋāĻŽ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŖāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻāĻŋāĻ āĻ°āĻ˛āĻŋāĻ¯āĻž I RNA āĻāĻ° āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻŋāĻŽ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻžāĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻāĻŋāĻ āĻĒāĻĻā§āĻ§āĻ˛āĻŋ āĻ¯āĻž āĻĒāĻ˛āĻ°āĻĒā§āĻ°āĻŋ DNA (cDNA) āĻāĻ° āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻ ā§ā§āĻŋāĻ¨āĻŽāĻ° ā§āĻŋāĻāĻŋāĻ°āĻžāĻ¯ā§ āĻĻā§āĻŦāĻžāĻ°āĻž ā§āĻŽā§āĻĒāĻ¨ā§āĻ¨ āĻšāĻ¯ āĨ¤ āĻāĻŋāĻ āĻŦā§āĻ˛āĻāĻŋāĻ āĻĒāĻĻā§āĻ§āĻ˛āĻŋ āĻ¯āĻž āĻāĻ°āĻžāĻāĻ¨ā§āĻ° āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻŽāĻ¨ā§āĻž āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛ā§āĻŋ āĻŋāĻŽ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ I 1975 ā§āĻžāĻ¨āĻŋ āĻāĻŋāĻāĻ¯āĻžāĻŋ āĻŋ āĻāĻŽ ā§āĻžāĻāĻĻāĻžā§āĻŋ āĻĻā§āĻŦāĻžāĻ°āĻž āĻāĻ˛āĻŦāĻˇā§āĻā§āĻŋ I 1979 ā§āĻžāĻ¨āĻŋ Alwine āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻŋāĻžāĻ° ā§āĻšāĻŋāĻŽā§āĻ°āĻž āĻĻā§āĻŦāĻžāĻ°āĻž āĻāĻ˛āĻŦāĻˇā§āĻā§āĻŋāĨ¤ 1981 ā§āĻžāĻ¨āĻŋ āĻŋāĻ˛āĻŦā§āĻ˛āĻ āĻ˛ā§āĻŋ āĻŦāĻžāĻ¨ā§āĻŋāĻ¨āĻāĻ° (W. Neal Burnette) āĻĻā§āĻŦāĻžāĻ°āĻž āĻāĻ˛āĻŦāĻˇā§āĻā§āĻŋ āĻšāĻ¯ I āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻ˛āĻŋ āĻā§āĻ āĻŋāĻŽ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨ā§ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ I āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻāĻ°āĻā§āĻ āĻŋāĻŽ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨ā§ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻāĻ°āĻžāĻā§ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ I āĻĒāĻ˛āĻŋāĻ¯āĻžāĻ° ā§āĻ¨ā§ āĻ āĻ¯āĻžā§āĻžāĻ¨āĻ°āĻžā§ āĻā§āĻŋ / āĻĒāĻ˛āĻŋāĻ āĻŋā§āĻŋāĻžāĻŽāĻāĻŋ āĻā§āĻŋ ( Agarose gel / polyacrylamide gel ) āĻāĻ¨āĻŋāĻ¨āĻ°āĻžāĻ¨ āĻžāĻ¨āĻ°āĻ˛ā§ā§ ā§āĻ˛āĻĄāĻŧāĻŋ I Denatured āĻŽāĻŋāĻžāĻŋāĻ˛āĻŋāĻšāĻžāĻāĻŋ āĻ āĻ¯āĻžā§āĻžāĻ¨āĻ°āĻžā§ āĻā§āĻŋ āĻĒāĻ˛āĻŋāĻ¯āĻžāĻ° ā§āĻ¨ā§ ā§āĻ˛āĻĄāĻŧāĻŋ SDS - PAGE ā§āĻ˛āĻĄāĻŧāĻŋ I āĻāĻŋāĻ˛āĻļāĻŋ āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ° ā§āĻ˛āĻĄāĻŧāĻŋ I āĻāĻŋāĻ˛āĻļāĻŋ āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ° ā§āĻ˛āĻĄāĻŧāĻŋ āĻāĻŦāĻĻā§āĻ¯āĻ˛āĻŋāĻŋ āĻ¸ā§āĻĨāĻžā§āĻžāĻ¨ā§āĻ¤āĻ° ā§āĻ˛āĻĄāĻŧāĻŋ I āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻāĻ°āĻžāĻŦ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ I āĻ˛ā§ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ ( c DNA) āĻāĻ°āĻžāĻŦ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ I āĻ°āĻžā§āĻ˛āĻŽāĻŋ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻŽāĻžāĻ§ā§āĻ¯āĻ˛āĻŽāĻŋ āĻ āĻ¯āĻžāĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŦāĻ˛āĻŋ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšāĻžāĻ° āĻšāĻ¯ āĻāĻ°āĻžāĻŦ āĻ˛āĻšāĻ¨ā§āĻ¨āĻŦāĨ¤ āĻ˛ā§āĻ˛āĻĻāĻŋāĻˇā§āĻ āĻ˛ā§ā§ āĻ˛ā§āĻ¨āĻŋāĻžāĻ¨āĻ¯āĻ¨ā§āĻ¸ āĻāĻŦāĻŋāĻ āĻ˛āĻŋāĻā§āĻ āĻ˛ ā§āĻžāĻ°āĻ˛āĻ°āĻ˛āĻ¨ā§āĻāĻŋāĻ ā§ā§āĻžāĻā§āĻ¤ āĻŋāĻ°āĻ¨āĻŋ āĻāĻ āĻā§āĻŦāĻ°āĻ¯ā§āĻ˛āĻā§āĻ¤ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯āĨ¤ āĻ˛ā§ā§ āĻā§āĻ¨āĻ°āĻļā§ āĻ˛āĻŦāĻ¨ā§āĻˇāĻ¨āĻŖ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ āĻāĻ°āĻžā§ āĻ˛ā§āĻŖāĻŋāĻ¨āĻ¯āĻ° ā§ā§āĻ¯ āĻŦāĻ¯āĻŦāĻšā§āĻŋ āĻšāĻ¯ I